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dPCR有什么原理?

信息来源:数字pcr仪_荧光定量pcr仪_金属浴_核酸提取仪_基因扩增仪_石家庄奥龙科技有限公司    2018-11-2

  dPCR是一种核酸分子绝对定量技术。dPCR一般包括PCR扩增和荧光定量分析。下面核酸提取仪厂家给大家说说dPCR有什么原理?

  20世纪末,Vogelstein等提出数字PCR的概念,通过将一个样本分成几十到几万份,分配到不同的反应单元,每个单元包含一个或多个拷贝的目标分子(DNA模板),在每个反应单元中分别对目标分子进行PCR扩增,扩增结束后对各个反应单元的荧光信号进行统计学分析。

  在PCR扩增阶段,与传统技术不同,dPCR一般需要将样品稀释到单分子水平,并平均分配到几万个反应腔室里反应。这样子相当于变相的对靶基因进行富集。与此同时,由于对原样品的大幅度的稀释,使得PCR抑制剂浓度显著降低,这样dPCR对初始PCR反应物里抑制剂的要求显著低于qPCR。

  不同于qPCR对每个循环进行实时荧光测定的方法,dPCR技术是在扩增结束后对每个反应单元的荧光信号进行采集,最后根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例得出靶分子的起始拷贝数或浓度。

  以上就是核酸提取仪厂家给大家说说dPCR的原理,希望对大家有帮助,想要了解更多相关内容,可以拨打我们的热线电话前来咨询,如需转载请注明出处。

核酸提取仪

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